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多肽合成儀的工作原理

更新時間:2023-06-29      點擊次數:1140
多肽是一種與生物體內各種細胞功能都相關的生物活性物質,它的分子結構介于氨基酸和蛋白質之間,是由多種氨基酸按照一定的排列順序通過肽鍵結合而成的化合物。
 
多肽合成是一個以樹脂(人工合成的固相介質)為載體,在一定的反應條件下重復添加氨基酸,經過化學反應后合成多肽的過程,多肽合成儀即是用來合成多肽的儀器。一般情況下,多肽合成儀整體由主體、傳輸設備、動力裝置以及軟件系統(tǒng)組成。
 
多肽合成儀以固相合成為反應原理,在密閉的防爆玻璃反應器中使氨基酸按照已知順序(序列,一般從C端-羧基端 向 N端-氨基端)不斷添加、反應、合成,操作最終得到多肽載體。固相合成法,大大的減輕了每步產品提純的難度。為了防止副反應的發(fā)生,參加反應的氨基酸的側鏈都是保護的。羧基端是游離的,并且在反應之前必須活化。固相合成方法有兩種,即Fmoc和tBoc。由于Fmoc比tBoc存在很多優(yōu)勢,現在大多采用Fmoc法合成,但對于某些短肽,tBoc因其產率高的優(yōu)勢仍然被很多企業(yè)所采用。
 
具體合成由下列幾個循環(huán)組成:
1、去保護:Fmoc保護的柱子和單體必須用一種堿性溶劑(piperidine)去 除氨基的保護基團。
2、激活和交聯:下一個氨基酸的羧基被一種活化劑所活化。活化的單體與游離的氨基反應交聯,形成肽鍵。在此步驟使用大量的超濃度試劑驅使反應完成。循環(huán):這兩步反應反復循環(huán)直到合成完成。
3、洗脫和脫保護:多肽從柱上洗脫下來,其保護基團被一種脫保護劑(TFA) 洗脫和脫保護。
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